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蛋白纯化过程中的七大常见问题详解

重组蛋白的纯化是生物学研究中的重要技术。为了研究蛋白的特定功能和结构，研究人员必须将重组蛋白从生物体中分离并纯化。蛋白纯化方法主要利用不同重组蛋白之间的相似性和差异性。可以根据蛋白之间的相似性去除非蛋白物质，然后根据蛋白之间的差异分离纯化目标重组蛋白。在蛋白纯化的过程中，我们可能会遇到一些问题。让我们一起来看看这些问题，并探讨相应的解决方案吧！

抗体Fab段的主要功能及制备方法

抗体是一种由B淋巴细胞或浆细胞产生的免疫球蛋白，它在人体免疫系统中扮演着重要的角色。抗体能够识别并结合抗原，从而启动补体级联反应或通过Fc段与效应细胞结合，引发免疫应答。抗体由轻链（L）和重链（H）组成，每条链都分为恒定区（C）和可变区（V）。可变区（V）负责识别和结合抗原，恒定区（C）则与抗体的效应功能相关。其中，Fab段是抗体的抗原结合片段，具有高亲和力和特异性，是抗体发挥生物学功能的重要部分。

单次与多次跨膜蛋白的特点和功能：多次跨膜蛋白的意义

义翘神州提供三大跨膜蛋白制备平台，有VLP技术平台、去垢剂技术平台、Nanodisc技术平台。

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杂交瘤技术制备单克隆抗体：详细流程与常见问题解析

杂交瘤技术是一种将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合生产单克隆抗体的传统方法。该技术通过将动物脾细胞与骨髓瘤细胞融合，产生永生化杂交瘤细胞系，然后筛选其上清液中的抗原特异性克隆，并进一步循环亚克隆以产生严格的单克隆抗体。 利用杂交瘤技术制备单克隆抗体通常操作流程为：抗原制备、抗原免疫动物、杂交瘤细胞制备、融合细胞的筛选、培养杂交瘤细胞制备抗体。在单克隆抗体制备过程中，常常会遇到细胞污染，细胞融合后不生长、亚克隆后的细胞株不分泌抗体以及细胞难以克隆等问题，本文将详细分析以上常见问题的产生原因以及解决该问题的方法。

噬菌体表面展示技术原理及四大分类详解

噬菌体展示技术(phage display technology)是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随外壳蛋白的表达而表达，同时，外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。

顺势作用元件预测结果说明

在顺式作用元件的预测结果中有一个结果表格，以下是对文件中每一列的详细说明： 第一列：基因ID； 第二列：顺式作用元件ID； 第三列：顺式作用元件碱基序列； 第四列：起始位置，顺式作用元...

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  • 发布于 2023-08-02 14:09
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蛋白质表达系统的类型及其优缺点

蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。

瞬时转染与稳定转染：差异与特点

哺乳动物细胞表达系统具有促使蛋白正确折叠和实现复杂修饰的功能，表达的蛋白更近天然状态，能够运用于制药等活性要求高的领域。利用哺乳动物细胞表达系统生产蛋白通常有两种方式：瞬时转染与稳定转染（构建稳定细胞系），这两种方式在原理、操作流程、应用场景上均有所区别，本文主要就瞬时转染与稳定转染之间的区别做一介绍。

实时定量PCR技术原理及标记方法详解

实时荧光定量PCR根据所使用的荧光标记方法可分为两种：荧光染料（SYBR Green I染料为主）和荧光探针（TaqMan探针）。

特殊染色技术的原理及其在实践中的应用

HE染色，全称为苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining)，是最基本的病理学染色技术，能够对正常组织和病理组织进行形态结构的观察。特殊染色是常规HE染色的必要补充，能够有针对性地对组织成分进行染色，使组织病理学评价更加完善精确，在临床病理学诊断和病理组织学研究具有重要的应用价值。除常规的HE染色外，义翘神州还提供9种特殊染色服务，包括masson三色染色、 PAS染色、尼氏染色、VG染色、苏丹黑染色、普鲁士蓝染色、油红O染色和β-半乳糖苷酶衰老染色等。

离子交换层析常见的七大问题解析

离子交换层析法是蛋白纯化的一种方式，通过带电的溶质分子与离子交换层析介质中可交换离子进行交换，从而达到分离纯化的目的。离子交换层析法主要依据电荷间的相互作用，利用带电分子中电荷的微小差异而进行分离，具有较高的分离容量。几乎所有的生物大分子都是极性的，都可使其带电，所以离子交换层析法的应用很广泛。下面为大家介绍在离子交换层析实验中遇到的七大问题，有对应的原因及解决方案：

蛋白纯化的原理、操作及注意事项有哪些？

不同的重组蛋白具有不同的氨基酸序列和空间结构，导致其物理、化学和生物学特性存在差异。我们也可以根据目标蛋白与其他蛋白和裂解液的性质差异设计合理的蛋白纯化方案。

NCBI 数据下载

介绍如何在大型生物数据库NCBI上下载数据

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  • Ti Amo
  • 发布于 2023-12-18 11:25
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离子交换色谱步骤及作用

离子交换层析(IEX)是一种主要基于蛋白净电荷的色谱分离方法，通常用于追踪脱酰胺和琥珀酰亚胺的形成。IEX有两种类型：阳离子交换和阴离子交换层析法。当缓冲液pH值高于此IP时，蛋白带负电（阴离子）；当pH值低于此IP时，蛋白带正电（阳离子）。下面主要介绍离子交换色谱操作中应注意的一些具体问题。

利用 NAS 对实验室数据进行存储备份

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  • 发布于 2023-12-28 14:21
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笔记本电脑本地连接以太网时如何手动设置IP？

一般情况下，我们笔记本在使用网线连接上网的时候，路由器会自动给你分配一个内网IP。这个IP也是不固定的。 有时候我们会突然遇到连接断网的情况。在排除硬件坏掉情况下，最大原因是自动分配的...

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  • 发布于 2024-02-26 18:01
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Orthology 定义

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  • 发布于 2023-08-14 17:46
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全能核酸酶SuperNucleaseFAQ详解：解开核酸酶的神秘面纱

义翘神州提供不同级别全能核酸酶，GMP级条件下生产的全能核酸酶SuperNuclease，无动物源性，可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的DNA及RNA。超高活性，应用场景广泛且使用量低不易残留，质量、性能、供货能力可靠，并已完成在FDA的药物主文件申报备案（DMF Number#:35978），满足药物申报的规范。

抗体生产的三个阶段-重组抗体的几种形式详解

重组抗体，也称为基因工程抗体，是指通过DNA重组技术将抗体相应的基因序列根据需要进行改造和重组，并构建在质粒上，再通过蛋白外源表达技术将构建好的质粒转染/转化入适合的宿主细胞表达获得的抗体。重组抗体很好的解决了动物源抗体引起的人体排斥反应，使得抗体实现人源化，使抗体的效能更为完善。