细胞培养那些坑:细胞长得慢、不贴壁,还有救吗?

其实,只要条件适于细胞生长,细胞在自己的“小房子”里面舒适自由,那么,它一定会长得很快,并且,形态越来越“漂亮”。

各类细胞产品是我们做实验研究的基础,一支小小的细胞,关乎我们各种实验的成功与否,细胞的”小事情“,在实验中都是”大事情“,如果你的细胞出现生长缓慢、不贴壁等情况,那你可要注意了,这就是细胞状态不好的信号,要及时“挽救”,不然很有可能细胞就濒临死亡。

609a09a486824162ad6fbf51e666efaf.png


问题一:细胞生长缓慢

细胞长得慢是细胞培养过程中比较常见的问题,一般来说,细胞活力和浓度一直是细胞健康的标志,细胞长得慢的话,活力和浓度可能都会直线下降。

造成细胞生长缓慢的主要原因及解决方法:

1,新配置的培养基以及换了新的血清,细胞不适应;

解决方法:最好使用最适宜的培养基,如果条件不允许,可以换液时不要全量换液逐渐增加新的培养基比例,1/4、1/2、3/4到1,多传代几次,让细胞慢慢适应。

2,细胞密度不够

有些细胞是细胞依赖性细胞,密度过低生长缓慢;也可能是细胞分泌促生长活性物质过少,细胞连接不好等原因。

解决办法:增加细胞接种密度;将细胞从大皿转移至小皿培养;适当增加培养基血清浓度。

3,培养环境改变

细胞培养箱的温度、CO2、细胞的生存环境要适宜,一般来说最佳温度:是37 ℃, CO2:浓度为5% , pH:为7.2-7.4,还有渗透压等,大家要注意调好,不要随意改变。

4,污染,如支原体,细菌,真菌等

解决办法:细胞污染是多方面的原因,一方面要严格无菌操作技术、保持清洁的环境,另一方面,污染之后要及时鉴别和处理,并且,建议大家使用品质良好的细胞株和培养基,这是是减少污染的最好方法。

5,细胞本身状态改变,如衰老等

解决办法:没有可逆的办法,只能及时更换新的细胞。

当然如果培养细胞是原代的话,生长速度是比较缓慢的,如果没有及时换液,营养成分不够,细胞也会生长缓慢。用螺旋口瓶培养细胞时,需将瓶盖微松,以保证通气,要保持培养箱内空气干净等。

其实只要条件适于细胞生长,细胞在自己的“小房子”里面舒适自由,那么,它一定会长得很快,并且,形态越来越“漂亮”。

问题二:细胞不贴壁

一般来说,正常情况下,细胞培养一段时间后,正常生长的小细胞们贴在壁上,优哉游哉地享受生活,而没能存活的细胞和其他种类的细胞则可能悬浮在上,如果你的细胞不贴壁,极有可能是没有存活下来。

细胞不贴壁可能原因及解决办法:

1,胰酶消化过度;解决方法:适当缩短胰酶消化时间或降低胰酶浓度。

2,支原体污染;解决方法:分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。

3,培养瓶瓶底不干净;解决方法:换用新的培养皿或者培养瓶。

4,消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当;解决方法:重新配置消化液或培养液

5,细胞老化;解决方法:同样,没有可逆的办法,只能及时更换新的细胞。

6,接种细胞起始浓度太低或太高;解决方法:根据细胞特性接种适量的细胞。

总之,养细胞需要耐心,要温柔,要不然她真的会给你颜色看哦。上文也提到了,使用品质良好的细胞株和培养基是减少污染的最好方法,同时也是保证细胞生长良好的前提。

推荐你使用——普诺赛高品质细胞系、原代细胞、血清、培养基、辅助试剂等

作为细胞行业标准的引领者,普诺赛(Procell)拥有华中地区最大的原代细胞库和细胞系库,能为您提供近千种原代细胞及细胞系产品,其中,人源细胞系提供STR鉴定报告、各种细胞完全培养基配套完善,并且,严格的质控体系确保质量标准和稳定性。此外,细胞如果质量问题,可无条件免费售后,让你全程无忧。

学霸姐姐只能帮你到这里了。。。。

f8ee8f7b74ff4840a829f25efb87d5f9.jpeg

生物女学霸,一个自称学霸其实很渣的生物汪,
努力将有趣的、有用的、有血有肉的科研那些事儿呈现给大家,
关注一个好不啦~



  • 发表于 2019-07-31 15:52
  • 阅读 ( 14874 )
  • 分类:实验相关

0 条评论

请先 登录 后评论
生物女学霸
生物女学霸

生物专业

120 篇文章

作家榜 »

  1. omicsgene 654 文章
  2. 安生水 325 文章
  3. Daitoue 167 文章
  4. 生物女学霸 120 文章
  5. 红橙子 78 文章
  6. CORNERSTONE 72 文章
  7. rzx 67 文章
  8. xun 66 文章