Hi-C pro报错:Pairing of R1 and R2 tags ... Logs: logs/Acer/mergeSAM.log make: *** [bowtie_pairing] Error 1

这个是hic pro得使用: usage : HiC-Pro -i INPUT -o OUTPUT -c CONFIG [-s ANALYSIS_STEP] [-p] [-h] [-v]Use option -h|--help for more informationHiC-Pro 3.1.0---------------OPTIONS   ...

这个是hic pro得使用:

usage : HiC-Pro -i INPUT -o OUTPUT -c CONFIG [-s ANALYSIS_STEP] [-p] [-h] [-v]
Use option -h|--help for more information
HiC-Pro 3.1.0
---------------
OPTIONS
   -i|--input INPUT : input data folder; Must contains a folder per sample with input files
   -o|--output OUTPUT : output folder
   -c|--conf CONFIG : configuration file for Hi-C processing
   [-p|--parallel] : if specified run HiC-Pro on a cluster
   [-s|--step ANALYSIS_STEP] : run only a subset of the HiC-Pro workflow; if not specified the complete workflow is run
      mapping: perform reads alignment - require fast files
      proc_hic: perform Hi-C filtering - require BAM files
      quality_checks: run Hi-C quality control plots
      merge_persample: merge multiple inputs and remove duplicates if specified - require .validPairs files
      build_contact_maps: Build raw inter/intrachromosomal contact maps - require .allValidPairs files
      ice_norm : run ICE normalization on contact maps - require .matrix files
   [-h|--help]: help
   [-v|--version]: version

报错这一步是跑完了比对现在需要 pairing(R1/R2 配对)。也就是说在指定得out文件夹下面得bowtie_results/bwt2/sample/里面已经存在了R1和R2得bwt2merged.bam

报错原因:

R1和R2得bwt2merged.bam没有按照readname排序

可以通过这个查看到是否排序:

samtools view -H Asample_R1_genome.final.bwt2merged.bam | grep SO:
# @HD     VN:1.0  SO:unsorted

解决方法:

重新排序后续跑

1. 排序:

cd out/bowtie_results/bwt2/sample/
mv sample_R1_genome.final.bwt2merged.bam sample_R1_genome.final.bwt2merged.bam.bck
mv sample_R2_genome.final.bwt2merged.bam sample_R2_genome.final.bwt2merged.bam.bck
samtools sort  -n -@ 8 -o sample_R1_genome.final.bwt2merged.bam   sample_R1_genome.final.bwt2merged.bam.bck
samtools sort -n -@ 8 -o  sample_R2_genome.final.bwt2merged.bam   sample_R2_genome.final.bwt2merged.bam.bck

2. 续跑:

cd ../../../../
HiC-Pro -i out/bowtie_results/bwt2/   -c ./config-hicpro.txt  -o ./out -s proc_hic

两个注意点:

一个是-i指定输入文件夹一定是包含bam文件得那个文件夹,而不是最开始得data文件夹(包含fastq文件的那个)

一个是 -s需要proc_hic



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