IF=9.4|多组学解析大口黑鲈高温胁迫适应机制

“ 2026年1月Genome biology杂志发表了一篇题为“Multiomics profiling reveals the adaptive responses of largemouth bass to high temperature stress”的多组学分析文章。”大口黑鲈是重要经济...

 2026年1月Genome biology杂志发表了一篇题为“Multiomics profiling reveals the adaptive responses of largemouth bass to high temperature stress”的多组学分析文章。

大口黑鲈是重要经济淡水鱼,全球变暖导致高温胁迫频发,引发其死亡率上升、养殖损失加剧,但高温适应调控机制研究匮乏。

通过多组学及形态生化分析,阐明大口黑鲈鳃、脑、肝组织对高温胁迫及恢复过程的适应机制,筛选关键调控基因/蛋白,为耐高温品种培育及水产养殖可持续发展提供理论支撑。

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01

分析结果

1. 重要组织和生化血液指标的变化
文章监测2023-2024年夏季养殖池水温(图AB),采集48h内三个时间点的大口黑鲈的鳃、脑、肝组织及血液样本(图D)
figure 1
对组织进行HE染色(图A)、透射电镜观察(图B),检测血清抗氧化(图C)及代谢相关生化指标(图D)。结果表明高温胁迫导致鳃、脑、肝组织及线粒体等细胞器损伤,恢复阶段损伤缓解;氧化应激是高温致大口黑鲈组织损伤的关键因素,且机体具备一定的损伤修复能力。
figure 2
2. 转录组分析和4D-DIA 蛋白组联合分析
提取三时间点、三种组织的总RNA,进行RNA-seq转录组测序。图A展示了鳃(Gi)、脑(Br)和肝脏(Li)样本之间的相关性分析。图B展示了样本之间主成分分析结果。之后进行差异分析,在鳃、脑、肝组织分别筛选出3649、2963、6496个DEGs,肝脏组织DEGs数量最多(图D)。文章认为肝脏组织在大口黑鲈高温响应的转录调控中发挥核心作用。在不同处理时间点的差异分组中,鳃、脑、肝组织分别有15、23、47个DEGs交叉存在(图E~F)同时提取对应组织的总蛋白,进行4D-DIA蛋白质组测序。图C展示了样本之间主成分分析结果。在不同处理时间点的差异分组中,鳃、脑、肝组织分别有154、102、167个DEPs交叉存在(图E~F),体现组织间高温响应的共性与特异性。

figure 3

对差异分析得到的DEGs进行GO(图A~I)和KEGG(图J~K)富集分析,如下图所示:
figure 4

之后文章整合转录组筛选的DEGs与蛋白组筛选的DEPs数据。开展DEGs与DEPs的表达相关性分析(图A~F),筛选二者共表达分子。发现DEGs与DEPs表达呈正相关,证实转录与翻译层面存在协同调控;筛选出共表达分子,有效缩小核心调控因子范围。为后续蛋白质相互作用(PPI)网络构建提供精准靶点。

figure 5

3. PPI网络与功能富集

采用共表达DEGs/DEPs数据构建PPI网络(图A),开展GO功能富集及KEGG通路富集分析(图B)。结果发现HSPA9为PPI网络核心蛋白;核心分子主要富集于蛋白质加工、PPAR信号通路、黏着斑等通路,不同组织、不同处理阶段的通路调控具有特异性,成功构建高温响应分子调控网络。从而明确了大口黑鲈高温响应的核心调控蛋白及关键通路,揭示多通路协同调控的分子机制。

figure 8

4. RT-qPCR验证

选取9个高温相关DEGs,通过RT-qPCR检测目标基因表达量,与转录组测序结果进行一致性验证。结果9个目标基因的表达趋势与转录组结果完全一致,转录组测序数据可靠性得到证实,为核心因子深入分析提供实验支撑。

5. Hspa9在热应激下的诱导表达模式

获取大口黑鲈及其他硬骨鱼HSPA9同源序列。通过RT-qPCR(图A)、Western blot(图B)、免疫组化检测Hspa9的表达及时序变化(图C),结合系统发育(图D)分析其保守性。

结果Hspa9的mRNA及蛋白在高温胁迫24h时显著上调、恢复48h时显著下调,肝脏上调最显著;验证HSPA9是大口黑鲈高温胁迫响应的核心调控因子,其高温调控功能具有进化保守性。

figure 9

文章链接:https://link.springer.com/article/10.1186/s13059-026-03964-9
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