总结:生化检测实验样本值不准的原因分析

生化检测并没有那么简单,在实验中,除标本本身的疾病因素之外,还有许多因素也可影响生化检测的结果。

我们口中的生化,也就是临床生物化学,是一门由化学、生物化学以及临床医学相结合之后,形成的一门独立学科,而作为体外诊断领域里最大也是发展最为成熟的一个学科,生化检测已经成为了医院检验中心或临床实验室日常工作中最为重要的一个部分。

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但是,生化检测并没有那么简单,在实验中,除标本本身的疾病因素之外,还有许多因素也可影响生化检测的结果,这些因素可能在分析过程的前中后,我们一起来仔细看看。

原因一:分析前因素

在实验室分析样品之前,分析前因素影响样品的组成,因此也将影响样品质量,这些因素是实验室分析中最重要和最常见的误差来源,却常在分析实验数据时被忽略。

分析前因素包括生物性和非生物性因素:

生物性因素一般是固有的,例如品种,年龄,和性别,但在评估检测结果时需考虑,实验室提供的绝大多数的参考值适用于健康的成年人或者动物,所以我们在实验之前最好控制其他生理性因素,例如当准备血液样本时,确保人或者动物已禁食12小时。

非生理性因素包括样本采集、处理和运输等过程中的一些不良因素。

比如:错误的静脉穿刺技术可能引起溶血,从而通过多种方式导致检测结果产生误差。

另外,抗凝剂的使用不正确使用,也会影响结果,目前临床上常用的抗凝剂有EDTA-2K、肝素、枸盐酸钠等,TBA和AFU不能用肝素抗凝剂,因为肝素会使TBA和AFU试剂发生混浊,导致吸光度假性偏高,从而使检测结果偏高。所以认真参阅试剂说明书,按照要求采集正确标本。

还有,标本放置过久或储存不当也会引起不准确的结果,比如: ALT (GPT) 即使冷藏或冷冻,也会以缓慢的速率逐渐下降,还有, 采血后若未立即将血清与血球分离,K (钾)、CPK 等会逐渐上升等,需要特殊方式保存实验标本的项目还很多,大家在实验之前一定要好好查阅清楚。

原因二:分析中因素

分析中因素主要是仪器测量分析物的过程中的不良因素,其中最常见的因素就是交叉污染。

交叉污染是生化仪使用中常见的现象,简单理解为在A项目测定中所使用的试剂、样本、反应产物、清洗剂等对B项目的测定产生了不良影响的现象,A项目和B项目不一定是相邻项目。

交叉污染具体类型可分为:(1)样本针携带污染;(2)试剂针携带污染;(3)搅拌棒携带污染;(4)清洗系统携带污染;(5)比色杯污染。

另外,由于仪器类型的差异,不同实验室会对检测结果产生不同影响。分析因素由样品固有属性引起,例如血脂的干扰,或分析仪本身的固有特征,仪器本身的误差可通过实验室的质量保证程序降至最小化。

原因三:分析后因素

分析后因素涉及到实验室数据呈现、存储和传递等不同方式,这里主要是取决于于大家在平时的实验操作中有没有规范的操作和严谨的态度,就不做多说了。

最后,除了以上影响因素之外,还有一些因素会影响化检测的结果,比如比较常见还有:不同批号试剂混合使用、试剂配比问题等。

在排除掉个人的操作问题,以及分析前中后的因素之后,如果你的生化检测还是有误差的话,那么,就建议大家选择——优质的生化检测试剂盒。

因为生化测定一般要经历调研文献、购买原料、配制试剂、调整体系等过程,这其中的干扰因素实在是太多太多了,而生化试剂盒择提供了生化检测所需的全套试剂和标准品,并附有详细的操作说明和参考文献,可帮助大家快速获得准确且可重复的结果,而且省时高效!

再也不用担心结果不准确了!

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最后,放一个学霸姐姐最近做的一个生化检测实验:

使用的是Elabscience家的总超氧化物歧化酶(SOD)比色法测试盒(WST-1法,货号:E-BC-K020-M)

性能参数:

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标曲曲线(仅供参考哈):

标准品稀释:取SIGMA公司生产的SOD(货号S7571-75KU)标准品用PBS(0.01 M,pH 7.4)稀释不同的浓度,测定相应的OD值,按公式计算抑制率如下表:

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实例分析(仅供参考哈):

按照操作过程,测定大鼠血清(稀释20倍,加样量为20 μL)、大鼠肝组织(10%组织匀浆的蛋白含量10.67 mg/mL,稀释360倍,加样量为20 μL)、西红柿(20%组织匀浆的蛋白含量2.44 mg/mL,稀释10倍,加样量为20 μL)和HepG2细胞(蛋白含量3.18 mg/mL,稀释30倍,加样量为20 μL)中的SOD活力。

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不得了了,学霸姐姐看发现这家的一个产品居然有11分的文献引用!

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Lee H Y, Back K. Melatonin induction and its role in high light stress tolerance in Arabidopsis thaliana [J]. Journal of pineal research, 2018.

这个J Pineal Res期刊,2018年IF=11.613,也是很牛了!!

学霸姐姐大致看了一下,这篇文章主要是讲拟南芥中褪黑激素的诱导及其在高光胁迫下作用,文献报道了植物为了防止ROS氧化损伤,进化出一系列的酶和非酶抗氧化防御系统,抗坏血酸过氧化物酶(APX)就是其中是一种酶。

所使用的产品是APX酶活检测试剂盒(货号:E-BC-K353-S)。

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搬来的图:使用Elabscience的APX酶活检测试剂盒测得的数据

啧啧,确实很不错的说!

最后,学霸姐姐还发现这家10月份有新品上市尝鲜价,部分生化试剂盒低至199元!!这也太划算了吧!!

有需要的小伙伴可以自行去Elabscience家看看有没有你需要的试剂盒。

好了,关于生化检测,学霸姐姐只能帮你到这里了,剩下的,只能靠你自己了!

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生物女学霸,一个自称学霸其实很渣的生物汪,努力将有趣的、有用的、有血有肉的科研那些事儿呈现给大家,关注一个好不啦~
  • 发表于 2019-10-09 16:07
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  • 分类:实验相关

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