科研小白:生物实验做不出来是种什么体验?

很多时候,我们的大量的时间都花在用排除法一个接一个地找原因上, 几星期找不到原因算正常!

关于这个问题,

学霸姐姐的某个师弟表示:

我连自己做出来过的实验都重复不出来,而且连续一个月都没做出来,你觉得我是什么感受?

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人生已经如此艰难,

而我们生物汪的人生,往往是难上加难。

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生物实验有多难做我就不说了吧,

实验虐我千百遍,如果条件慢慢摸得清也就罢了,

见鬼的是结果往往毫无规律性,实验的每一步都有可能是出问题的地方,

简直是匪夷所思到让人怀疑人生。

而且,身后还有Deadline,还有各种组会汇报。。。。。

实验重复不出来?你不是一个人!

早在前几年,Nature期刊发表了一篇名为“1500 scientists lift the lid on reproducibility”的文章,

文章中公布的一项数据让学霸姐姐“豁然开朗”:

超过70%的科研工作者,在尝试重复另一位科学家的实验时以失败告终;

超过50%的研究人员未能复制自己的实验。

你看,这不是很正常嘛,你们把实验做出来了才是不正常的吧!!

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为什么生物实验结果难以重复?

为什么我们丝毫不差地严格遵守”实验操作准则“,也未必能够得出一致性的结果?

这是因为生物实验往往对样品的储存条件,样品的纯度、浓度,甚至样品的功能有更严苛的要求,使其成为难以重复的重灾区。

很多时候,我们的大量的时间都花在用排除法一个接一个地找原因上,

几星期找不到原因算正常!

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同时,生物实验需要各种各样的控制实验,以及从不同角度,多方位实验的验证来避免假阳性。。。

但是,说到底,难重复也得重复。。。。。

做不出来还得做不是嘛。。。。

划重点:实验做不出来,很有可能是买的原料有假!

对于我们生物专业的人来说,最大的坑就是——抗体造假。

要知道,我们的WB、IHC、ELISA 等常规实验技术都不离开抗体,抗体的质量优劣关乎实验的成败。

而抗体造假,是整个试剂行业最严重的现象。

据权威机构显示,在上千份抗体产品质量投诉中,假货问题占了 43%;在 500 份问卷调查中,有 43% 的人曾使用假冒伪劣试剂耗材;703 位生物学家,50% 无法重复自己的实验结果。

究其原因,一方面是因为抗体市场庞杂带来了抗体质量的残次不齐,另一方面则是因为抗体本身就具有抗原交叉反应性、多样性和实验差异性,进而也会影响抗体的特异性和亲和性。

那么,到底怎么选抗体靠谱?

学霸姐姐觉得可以一句话概括——看文献参考!!

网上可能有很多挑抗体的教程,但是学霸姐姐觉得最保险的方法还是根据参考文献来选择,

一方面,科研人员参考文献中的抗体以及实验方法,省去了很多摸索条件的时间。

另一方面,有大量文献引用的抗体是值得信赖的,引用该品牌抗体发表的一篇篇SCI文章就是其品质的最好证明。

通过大量的筛查+验证,学霸姐姐还真发现了一家不错的抗体,首先,先看文献:

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标题:Gut-derived endotoxin stimulates factor VIII secretion from endothelial cells. Implications for hypercoagulability in cirrhosis

期刊:Journal of Hepatology

IF:12.486

产品名称:RAB27A Polyclonal Antibody

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标题:The arginine methyltransferase CARM1 represses p300•ACT•CREMτ activity and is required for spermiogenesis

期刊:Nucleic Acids Research

IF:10.162

产品名称:p300 Polyclonal Antibody

这两篇10分以上的文献,所使用的的抗体均来自同一家公司——Elabscience!

相关文献还有很多,如果大家感兴趣的话,可以自己去查阅。

学霸姐姐只是为大家提供一个参考;

另外,Elabscience家的抗体现在开学季有优惠,我们实验室的抗体已经统统备足了。。。

好了,学霸姐姐只能帮你到这里了,剩下的,就靠你自己了!

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生物女学霸,一个自称学霸其实很渣的生物汪,
努力将有趣的、有用的、有血有肉的科研那些事儿呈现给大家,
关注一个好不啦~
  • 发表于 2019-09-27 16:13
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  • 分类:实验相关

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