高通量测序中经常说的插入片段是指什么?

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红橙子

解答该问题需要从高通量测序文库的构建说起:步骤一般如下:

  1. 利用超声或者酶切技术把从细胞中提取出来的DNA/RNA 进行打断,然后末端修复,RNA 需要反转成cDNA;
  2. 电场跑胶,专业术语是凝胶电泳——DNA分子在电场里“游泳”,由于不同长度的DNA分子片段所带电量(负电荷)不同,在电场作用下,短的就跑得快长的就慢,一段时间之后不同长度的DNA片段就在电场中分开了;
  3. 在2的基础上,挑选出特定长度的DNA序列——比如我们挑选300bp长度的序列,它们就是我们要测序的主体序列,也就是要被植入的“插入片段”.
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  • 红橙子 提出于 2020-03-04 16:13

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