我用不同的家族基因CDS黏贴到NCBI,发现100%序列的结果是相同的基因,感觉用包含内含子的完整基因序列来设计要好一点。但是发现用包含内含子的完整序列通过NCBIprimerblast来设计引物,发现不能选择跨内含子。不知道哪种方法好些。
引物设计原则“引物应在核酸序列保守区内设计并有特异性;引物通常设计为跨内含子”,具体参考笔记:https://www.omicsclass.com/article/2227